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Add&Read Human TNF alpha Quantitative Detection Kit

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Add&Read Human TNF alpha Quantitative Detection Kit

操作简便、快捷,细胞因子高通量检测的理想工具!
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DD2704-01/02/03
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Add&Read Human TNF alpha Quantitative Detection Kit

操作简便、快捷,细胞因子高通量检测的理想工具!

操作简单、检测范围宽,检测上限可达32000 pg/ml。

图 1:Human TNF alpha Kit工作原理                                  

肿瘤坏死因子α (TNF alpha)是一种主要由巨噬细胞单核细胞产生的促炎细胞因子,能够直接杀伤肿瘤细胞而对正常细胞无明显毒性。TNF alpha在细胞内组装,形成一个非共价连接的同源三聚体,并在细胞表面表达。TNF alpha参与正常炎症反应和免疫反应,可以通过协同调节其它细胞因子的产生、细胞存活和死亡来协调组织的稳态。  

本试剂盒采用夹心法检测TNF alpha含量,试剂盒中有TNF alpha Standard以及两株特异性识别TNF alpha的单克隆抗体,其中一株抗体偶联Eu (供体Anti-TNF alpha-Eu),另一株抗体偶联A3 (受体Anti-TNF alpha-A3)当两株抗体同时与TNF alpha结合时,Anti-TNF alpha-Eu和Anti-TNF alpha-A3距离靠近,可发生荧光共振能量转移(FRET) 。使用320 nm的激发光激发荧光供体,供体发射620 nm的光,此620 nm的光激发荧光受体,受体发射出665 nm的光。样本中待测TNF alpha浓度与FRET信号值(665 nm/620 nm的光强度比值)成正比(图1)

具有更宽的检测范围,减少样本稀释步骤

Human TNF alpha Kit检测范围为36~32000 pg/ml (图2、表1),相比市面上同类试剂盒具有更宽的检测范围,减少样本稀释步骤,更加节省操作时间。

                                              

                                                                                         

细胞上清检测结果与竞品有良好的一致性

分别使用Vazyme Human TNF alpha Kit与Competitor对应产品进行细胞上清样本检测,结果一致性良好(图3)。

图 3

 

应用示例

LPS是PBMC中B细胞的特异性激活剂,能够引发PBMC中IL6和TNF alpha释放的显著增加;JTE 607是一种高选择性炎性细胞因子合成抑制剂,可以抑制LPS刺激PBMC产生炎性细胞因子。使用本产品可检测到预期的JTE 607抑制作用(图4)。

图 4

试剂盒于-30 ~ -15℃保存,≤0℃运输;避免强光直射。

关键词:
细胞因子
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Q1:孔板的选择

A1:由于反应体系为20 μl,我们推荐使用96/384低吸附浅孔板进行检测。

Q2:酶标仪的使用

A2:我们推荐使用具有时间分辨荧光或者均相时间分辨荧光模块的多功能酶标仪进行检测,检测波长设置:激发光320 nm;发射光:620 nm,665nm。

Q3:光信号容易淬灭吗?

A3:本试剂的荧光供体的荧光不易淬灭,并可多次激发。

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