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VAMNE MagUltra Blood Genomic DNA Extraction Kit

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    DM101(单页)V23.1.pdf

    大小:
    2023-05-19 10:03:48
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VAMNE MagUltra Blood Genomic DNA Extraction Kit

血液gDNA快速、高效提取,遇疑难样本更显优势
价格:
¥
750.0
市场价
0.0
浏览量:
1000
货号:
DM101-01/02
所属分类
磁珠法提取
数量:
-
+
库存:
19998
*具体价格咨询当地业务员
暂时无货
1
产品详情
FAQ
组分
说明书
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VAMNE MagUltra Blood Genomic DNA Extraction Kit

磁珠法血液基因组DNA提取试剂盒

血液gDNA快速、高效提取,遇疑难样本更显优势

酶切;PCR;荧光定量PCR;文库构建;Southern杂交等

  • 灵活高敏:兼容50μl-1 ml EDTA、枸橼酸钠和肝素钠外周血、脐带血、骨髓血、浓缩血,拭子液,禽类有核血液和细胞等
  • 安全无毒:无需酚、氯仿等有机试剂
  • 快速便捷:采用磁性吸附,40 min内完成小体积提取
  • 量高质优:提取的gDNA产量高、纯度优、完整性好

本试剂盒适用于从50 μl - 1 ml新鲜和冻存的抗凝全血样本中简便快捷地提取基因组DNA。试剂盒基于超顺磁磁性粒子纯化技术和独特的试剂体系,能够有效去除各种杂质而特异地吸附基因组DNA,此过程无需酚氯仿等有机试剂,1 h内即可得到纯度高、质量稳定的基因组DNA,提取产物可直接用于酶切、PCR、荧光定量PCR、文库构建、Southern杂交等下游实验。

1.体系灵活

使用Vazyme #DM101分别提取体积为100、200、500、1000 μl的EDTA冻存全血、反复冻融血和浓缩血,1%凝胶电泳检测提取产物完整性(图1)。结果表明Vazyme #DM101兼容体系灵活且适用于多种血液样本,提取产物无RNA残留和蛋白污染。

图1. 不同EDTA冻存血液样本不同投入体积下gDNA产物凝胶电泳图

 

2.量高质优

使用Vazyme #DM101与市场上同类产品(Supplier A-D)同时提取200 μl EDTA、枸橼酸钠和肝素钠冻存全血的gDNA,用Qubit测定浓度(图2A),OneDrop测定纯度(图3),1%琼脂糖凝胶电泳检测完整性(图4),qPCR检测提取产物对下游扩增是否有影响(ΔCt值= SupplierA-D的Ct值-DM101的Ct值)(图2B)。结果表明Vazyme #DM101提取产量和Supplier A相当,高于Supplier B-D;纯度均优于Supplier A-D;提取产物无RNA残留和蛋白污染且对下游qPCR扩增无抑制。

图2. 不同抗凝冻存全血gDNA产量和qPCR比对结果

图3. 不同抗凝冻存全血gDNA纯度比对结果

图4. 不同抗凝冻存全血gDNA产物凝胶电泳图

 

组分

DM101-01

(50 rxns)

DM101-02

(200 rxns)

BOX1

MagUltra Beads

1 ml

4 ml

 

Proteinase K

1 ml

4 ml

BOX2

Buffer DCL

20 ml

80 ml

 

Buffer WA

33 ml

2 x 66 ml

 

Buffer WB

10 ml

40 ml

 

Elution Buffer

20 ml

80 ml

 

Buffer EL

60 ml

240 ml

MagUltra Beads:吸附基因组DNA;Proteinase K:消化样本中的蛋白;Buffer DCL:释放基因组DNA;

Buffer WA:去除DNA中残留的蛋白等杂质;Buffer WB:去除DNA中残留的盐离子;

Elution Buffer:洗脱磁珠上吸附的基因组DNA;Buffer EL:裂解红细胞。

BOX 1,2 ~ 8℃保存,根据不同目的地调整运输方式;

BOX 2,15 ~ 25℃保存,室温运输。

关键词:
DM10102
DM101
磁珠法血液基因组DNA提取试剂盒
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Q1:白血病患者血液、脐带血等细胞含量高的样本及细胞样本的投入量?

A1:建议此类血液投入量在50 - 200 μl之间,细胞投入量<107,且需延长裂解时间(≥15 min),确保裂解充分。

Q2:裂解和洗脱均在水浴锅中进行,可否更换为边加热边振荡的金属浴?

A2:可以。

Q3:鸡、小鼠、猪等其他动物血液可以提吗?

A3:目前测试过猪血、小鼠、猴子血液和鸡血;禽类和两栖类有核血液建议样本投入量为5-20 μl。

Q4:血液保存时长的要求是什么?

A4:建议-80℃保存时长为一年内,测过保存2年的血液提取效果也是可以的。

Q5:全血可以提取cfDNA吗?

A5:cfDNA提取建议使用血清血浆样本,全血中红细胞破裂释放的核酸酶会降解cfDNA。

Q6:Proteinase K保存不当导致其活性降低或失活?

A6:更换新的Proteinase K进行消化反应。

Q7:样本裂解不充分?

A7:提取时使样本与Proteinase K及Buffer DCL充分混匀,可适当延长65℃水浴裂解时间,增加颠倒混匀次数。

Q8:洗脱液问题?

A8:建议用Elution Buffer洗脱;若用ddH2O或其它洗脱液,确认洗脱液pH值在7.5 - 8.5之间。

Q9:提取产量比正常时相比较低?

A9:加入Elution Buffer后,未将磁珠充分混匀,应适当延长振荡混匀的时间至磁珠充分混匀;或者是晾干时间过长,磁珠出现龟裂现象导致洗脱困难,室内温度过高时,建议缩短晾干时间。

Q10:乙醇残留导致OD260/230偏低?

A10:可用小枪头去除残液,待磁珠晾干(表面无反光)后加入洗脱液。

 

组分

DM101-01

(50 rxns)

DM101-02

(200 rxns)

BOX1

MagUltra Beads

1 ml

4 ml

 

Proteinase K

1 ml

4 ml

BOX2

Buffer DCL

20 ml

80 ml

 

Buffer WA

33 ml

2 x 66 ml

 

Buffer WB

10 ml

40 ml

 

Elution Buffer

20 ml

80 ml

 

Buffer EL

60 ml

240 ml

 

MagUltra Beads:吸附基因组DNA;Proteinase K:消化样本中的蛋白;Buffer DCL:释放基因组DNA;

Buffer WA:去除DNA中残留的蛋白等杂质;Buffer WB:去除DNA中残留的盐离子;

Elution Buffer:洗脱磁珠上吸附的基因组DNA;Buffer EL:裂解红细胞。

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