
Phos-assay Acrylamide
Phos-assay Acrylamide
无磷酸化抗体可用?快来解锁蛋白磷酸化检测新玩法!
蛋白磷酸化检测
分离效果好:可以分离出不同形式的磷酸化蛋白。
适用范围广:适用于纯化蛋白、细胞裂解液和体外激酶反应液等多种样本类型;
适用于Mn2+/Zn2+离子体系;
适用于无抗体可用的磷酸化蛋白检测;
适用于CBB染色、免疫印迹和质谱等多种下游实验。
组分齐全:有配套的金属离子。
操作简便:可同时检测磷酸化与非磷酸化,与常规SDS-PAGE操作程序几乎相同。
无放射性:不含放射性元素,非荧光物质。
稳定性好:溶液状态可在4℃避光条件下保存一年。
Phos-assay是一种能与磷酸分子特异性结合的双核金属络合物,用于分离和检测磷酸化蛋白。使用过程中只需在常规SDS-PAGE凝胶中添加Phos-assay和金属离子(Mn2+或Zn2+)即可。固定在凝胶上的Phos-assay复合物可以特异性结合磷酸化氨基酸,使得磷酸化蛋白电泳迁移率降低,从而实现磷酸化和非磷酸化蛋白的分离。Phos-assay SDS-PAGE操作简单,能检测不同形式的磷酸化蛋白,不受磷酸化抗体限制,可用于免疫印迹、质谱分析等。
1. 分离效果好
使用碱性磷酸酶以时间梯度和剂量梯度处理α-酪蛋白和β-酪蛋白,使用常规SDS-PAGE 和Phos-assay SDS-PAGE用CBB染色检测样品中磷酸化与非磷酸化蛋白的变化情况。
图1. 不同处理条件下纯化蛋白的CBB染色结果图
2. 适用范围广
除了纯化蛋白,Phos-assay SDS-PAGE还可以检测细胞裂解液、组织裂解液和激酶反应液等多种样本类型的磷酸化与非磷酸化蛋白表达。
图2. 不同样本磷酸化与非磷酸化蛋白检测结果图
(从左至右,样本类型依次为:细胞裂解液、激酶反应液、植物组织裂解液)
2 ~ 8℃避光保存

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