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UltraClean Universal Plus DNA Library Prep Kit for Illumina V3

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    UND637(单页版说明书)V23.1.pdf

    大小:
    2023-08-14 15:48:56
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UltraClean Universal Plus DNA Library Prep Kit for Illumina V3

针对病原领域的“快”“净”“准”片段化酶建库试剂盒
零售价
¥
6400.0
市场价
0.0
浏览量:
1000
产品编号
UND637-01/02
所属分类
UltraClean系列
数量
-
+
库存:
19998
1
产品详情
FAQ
组分
说明书
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UltraClean Universal Plus DNA Library Prep Kit for Illumina V3

针对病原领域的“快”“净”“准”片段化酶建库试剂盒

病原宏基因组测序,mNGS病原检测行业

  • 建库时间快——单个文库建库时间短至100 min
  • 背景菌干净——严格控制背景核酸
  • 病原检出准——准确检出样本病原体

UltraClean Universal Plus DNA Library Prep Kit for Illumina V3(UND637)是针对Illumina高通量测序平台定向开发的超快速酶切法DNA文库构建试剂盒。本试剂盒简化了建库流程、缩短了操作时间,单个文库构建耗时约2 h,且兼具文库转化率高和背景菌干扰低的特性。兼容起始投入量为100 pg - 500 ng,适用于肺泡灌洗液、血细胞、血清、血浆、脑脊液等不同样本类型的DNA,可以更好的应用于病原微生物检测领域等。

1. 文库产出

UND637可兼容0.1-500 ng投入量建库,且不同投入量下文库产出均可达到μg级别,高于Supplier A、Supplier B公司同类产品文库产出。

2. 样本兼容性

临床样本(如血浆、脑脊液、肺泡灌洗液等)、PCR产物、cf DNA、cDNA及鲑鱼gDNA等不同类型样本使用UND637建库后均可成功出库,且文库产出>1 ug。

3. EDTA兼容性

UND637可耐受体系中终浓度为0-3.5 mM的EDTA(下图为300 ng核酸打断纯化后结果)。

组分

UND637-00

UND637-01

UND637-02

FEA Enzyme Mix V3

60 μl

240 μl

960 μl

Rapid Ligation Buffer V3

180 μl

720 μl

4 × 720 μl

Rapid DNA Ligase V3

30 μl

120 μl

480 μl

VAHTS HiFi Amplification Mix

150 μl

600 μl

4 × 600 μl

PCR Primer Mix 3 for Illumina

30 μl

120 μl

480 μl

Enhancer Buffer

60 μl

240 μl

960 μl

 

-30 ~ -15℃保存,≤0℃运输。

 

关键词:
UND63702
UND63701
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Q1:建库后文库产出低,且存在双峰。

A1:系过度扩增所致——PCR反应后期,引物通常会比dNTP先被耗尽。此时,过多的循环会造成扩增产物解链后进行非特异性退火,产生非互补链交叉退火产物。这些产物在依赖电泳的检测方式中迁移速率比较慢,在高分子量区域呈现弥散分布。它们是由正确长度的单链文库构成,在变性后能够与Flow Cell正常结合并被测序。因此,其存在与否对测序而言并无显著影响。然而,因产物不是完整的双链结构,当使用基于识别双链DNA的荧光染料来进行文库定量时,定量结果会比实际值偏低。

 

Q2:文库存在接头二聚体。

A2:可适当降低接头浓度(接头用量建议按照说明书推荐进行);同时,接头连接步骤时,注意接头不可与其他试剂预混。

 

Q3:临床样本(如血浆等)核酸测不出浓度,如何保证成功出库?

A3:对应测不到浓度的样本,可以盲投10-30 ul进行建库,或者掺入0.1-0.5 ng 293gDNA/拟南芥DNA以保证出库。

组分

UND637-00

UND637-01

UND637-02

FEA Enzyme Mix V3

60 μl

240 μl

960 μl

Rapid Ligation Buffer V3

180 μl

720 μl

4 × 720 μl

Rapid DNA Ligase V3

30 μl

120 μl

480 μl

VAHTS HiFi Amplification Mix

150 μl

600 μl

4 × 600 μl

PCR Primer Mix 3 for Illumina

30 μl

120 μl

480 μl

Enhancer Buffer

60 μl

240 μl

960 μl

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