
Mut Express MultiS Fast Mutagenesis Kit V2
Mut Express MultiS Fast Mutagenesis Kit V2
一步实现目标质粒不连续多位点(3-5位点)突变
DNA多位点突变
广泛适用:适用于20 kb以内质粒任意位点的扩增
模板使用量低:扩增以指数方式进行,有利于原始甲基化模板的降解
操作简单:扩增产物经DpnI消化后可直接用于重组反应;一步实现目标质粒上3-5个不连续位点(相距超过50 bp)的定点突变
设计简单:提供在线引物设计软件CE Design
使用Mut Express MultiS 进行不连续三点突变实验流程:
以待突变位点A、B、C 为界,将质粒分为AB、BC 和CA 三段。在每个待突变位点处设计部分反向互补的引物。以原始质粒为模板,分别扩增AB 段(A Forward Primer 和B Reverse Primer)、BC 段(B Forward Primer 和C Reverse Primer) 和CA 段(C Forward Primer和A Reverse Primer) (I)。扩增产物经DpnI消化(I) 后,进行重组环化(II)。重组产物直接进行转化即可完成定点突变(III)。
本试剂盒是基于ClonExpress快速克隆技术的多位点定点突变系统,专门针对多位点定点突变而优化的重组酶和反应缓冲液,可一次性向目标质粒上三至五个不连续位点同时引入定点突变,操作简便,成功率高。该试剂盒由Phanta Max Super-Fidelity DNA Polymerase扩增模块和ClonExpress快速克隆模块组成,扩增模块较高的保真度降低了扩增过程中引入新突变的可能性,高效同源重组技术提高了环化效率。使用本试剂盒进行DNA定点突变时,引物设计灵活、模板需求量低,且如扩增产物特异,DpnI消化后可不进行DNA纯化而直接用于重组反应。
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