
ClonExpress II One Step Cloning Kit
ClonExpress® II One Step Cloning Kit
非连接酶依赖型单片段快速克隆试剂盒
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简单、快速、高效,适用于任何载体
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无需考虑插入片段携带的酶切位点
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可高效克隆 50 bp-10 kb 的 DNA 片段
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线性化克隆载体和 PCR 产物可不纯化直接克隆
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无连接酶,无自连,阳性率 >95%
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提供在线引物设计软件CE Design
1.克隆效率极高
图1
重组产物转化后平板上一般可形成数千个单克隆,而无插入片段的阴性对照反应转化后只有数个单克隆形成。因此ClonExpress® 系统的自连背景会大大降低连接酶依赖的克隆方式。
2.克隆阳性率95%以上
图2
鉴定酶切结果表明,克隆阳性率可达95%以上。
ClonExpress® 技术是一种简单、快速并且高效的 DNA 无缝克隆技术,可将插入片段定向克隆至任意载体的任意位点。 ClonExpress® II 是新一代重组克隆试剂盒,包含增强的重组酶 Exnase® II。使用任意方式将载体进行线性化;在插入片段正 / 反向 PCR 引物 5’ 端引入线性化载体的末端序列,使得 PCR 产物 5’ 和 3’ 最末端分别带有和线性化载体两末端一致的序列 (15 bp-20 bp)。这种两端带有载体末端序列的 PCR 产物和线性化载体按一定比例混合后,在Exnase®II 重组酶的催化下,仅需反应 30 min 即可进行转化,完成定向克隆,阳性率可达 95% 以上。
组分 |
C112-01 (25 rxns) |
C112-02 (50 rxns) |
5 × CE II Buffer |
100 μl |
200 μl |
Exnase® II |
50 μl |
100 μl |
500 bp control insert (20 ng/μl) |
5 μl |
5 μl |
pUC19 control vector,linearized (50 ng/μl,Amp+) |
5 μl |
5 μl |
- 30℃~-15℃保存

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