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5 min TA/Blunt-Zero Cloning Kit

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C601_pCE2-TA-Blunt-Zero_vector序列信息.docx

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5 min TA/Blunt-Zero Cloning Kit

基于拓扑异构酶的平末端/TA兼容性入门克隆试剂盒

价格：

966.0

市场价

元

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货号：

C601-01/02

所属分类

拓扑克隆

数量：

库存:

79988

*具体价格咨询当地业务员

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产品详情

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组分

说明书

相关文献

5 min TA/Blunt-Zero Cloning Kit

基于拓扑异构酶的平末端/TA兼容性入门克隆试剂盒

TA克隆；平末端克隆

· 兼容：能够同时兼容TA克隆和平末端克隆；

· 快速：加入片段，反应5 min即可。

· 高效：克隆效率高且阳性率＞95%。

1.兼容性强

2.简单快速

3.阳性率高：使用插入片段为1kb，转化后随即挑取单克隆进行菌落PCR鉴定，Marker为诺唯赞DL5000 DNA Marker（MD102）

本产品作为第二代TOPO克隆试剂盒，包含有第二代Topoisomerase和自杀基因ccdB的载体，当插入片段与载体成功连接时，破坏ccdB正确表达，宿主细胞能够正常生长，否则宿主细胞不能正常生长，从而实现“Zero”背景。第二代Topoisomerase与合适buffer配合，活性更高，进一步提高克隆效率，室温5 min完成高效连接。此外，本试剂盒还添加了平末端化因子，可同时兼容TA克隆与平末端克隆。

组分	C601-01(25 rxns)	C601-02(50 rxns)
5×TA/Blunt-Zero Cloning Mix^a	25 μl	2 × 25 μl
500 bp Control insert(20 ng/μl)	5 μl	10 μl
M13 Primer Mix(10 μM)^b	200 μl	400 μl

a.包含Topoisomerase和pCE2 TA/Blunt-Zero Vector(双抗性载体：Amp+，Kan+)

b.包含M13 Forward Primer 和M13 Reverse Primer

-30～-15°C保存，可于-20～0°C运输。

关键词:

C601

TOPO克隆；TOPO平端克隆；克隆；TA克隆；TOPO快速克隆；快速克隆；快速TA克隆；TOPO Cloning；Cloning；DNA克隆；拓扑克隆；平末端克隆；DNA克隆；分子克隆

Q1:平板上长不出克隆/克隆数很少/空载体

插入片段必须为PCR产物，而不能为酶切产物，而且插入片段引物5’端不能为磷酸化。
插入片段长度选择：插入片段的长度在50bp-10kb;
如果插入片段回收浓度较低时（<20ng/μl），需要重新制备插入片段，多管浓缩，以提升插入片段浓度，同时跑胶确保PCR产物的完整性。若插入片段回收浓度较高，需将其稀释以保证其添加体积数≥1μl。
按照说明书推荐公式对插入片段投入量进行计算，避免小体积（小于1μl）加入体系中
可以延长克隆时间至30min，反应最好是在PCR仪中进行。
合适的克隆温度为25℃。