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Hyperactive pAG-Tn5 Transposon for CUT&Tag

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    S614(单页版说明书)V23.1.pdf

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    2023-09-13 15:56:38
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Hyperactive pAG-Tn5 Transposon for CUT&Tag

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Hyperactive pAG-Tn5 Transposon for CUT&Tag

CUT&Tag

抗体兼容性强:Protein AG可兼容多种来源抗体

细胞起始量低:可兼容低至单细胞

纯度高:蛋白纯度高,核酸残留低

Hyperactive pAG-Tn5 Transposon是已与接头包埋的转座子,专门适用于蛋白质-DNA互作研究的CUT&Tag (Cleavage Under Target&Tagmentation)技术。CUT&Tag技术是一种研究蛋白质-DNA相互作用的新技术,将定向进化的转座酶与Protein AG相融合,在抗体引导下靶向目的蛋白,并在目的位点附近进行DNA的片段化。与传统的蛋白质-DNA互作研究方法ChIP-Seq相比,CUT&Tag具有显著优势,该技术实验周期短,信噪比高,可重复性好,且细胞投入量低,尤其适用于早期胚胎发育、干细胞、肿瘤以及表观遗传学等研究领域。

片段化活性检测

使用S614针对不同DNA投入量(50 ng和100 ng)进行片段化活性检测,如图所示,1 μl转座子即可快速(10 min)实现DNA片段化。

-30 ~ -15℃保存,≤0℃运输。

未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

Q1:CUT&Tag适用于什么物种?

A1:CUT&Tag广泛适用于常规哺乳动物细胞的蛋白质-DNA互作研究,植物等细胞可以经过特殊的处理(破除细胞壁或者提取细胞核)进行实验。

 

Q2:CUT&Tag的抗体如何选用?

A2:一抗优先选用已验证过的ChIP级别抗体,其次选用IF级别抗体,目前也有发表Flag、His等标签抗体的CUT&Tag文章,对于WB级别抗体,请谨慎尝试。二抗要根据一抗的种属进行选择,且不带任何修饰,避免抗原表位决定簇的遮盖影响pAG-Tn5的结合。

 

Q3:CUT&Tag实验中细胞活性很重要吗?

A3: 非常重要。细胞活性和细胞核完整性是CUT&Tag实验成功与否的先决条件,生长状态不佳或死亡的细胞中,染色质易变得松散,Tn5会对开放片段进行随机切割,导致文库质检峰形图不呈现ladder状而是宽峰,下机数据中也会出现较强的背景噪音。

 

Q4:S614能搭配CUT&Tag试剂盒使用吗?

A4:可以搭配TD903和TD904。

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