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HisyGo RT Red SuperMix for qPCR (+gDNA Wiper)

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    RT101(单页版说明书)V23.1.pdf

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    2023-12-04 09:23:47
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HisyGo RT Red SuperMix for qPCR (+gDNA Wiper)

移液可视,高效逆转
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HisyGo RT Red SuperMix for qPCR (+gDNA Wiper)

红色示踪型qPCR专用逆转录预混液(去基因组)

移液可视,高效逆转

第一链cDNA合成;逆转录;基因表达分析;两步法qRT-PCR检测

HisyGo RT Red SuperMix for qPCR (+gDNA Wiper)为全新一代可示踪qPCR专用逆转录试剂,在高效合成cDNA的同时,实现移液可视化。试剂盒中的5×gDNA Wiper Mix可去除RNA模板中残留的基因组DNA,因此无需跨内含子设计qPCR引物。4×HisyGo qRT Red SuperMix中含有逆转录反应所需的所有组分,加入模板RNA和RNase-free ddH2O即可迅速进行反应,同时具有终止gDNA Wiper的作用。本试剂中包含的红色示踪染料经过精心优化,不会对下游染料法或探针法qPCR的荧光信号采集产生干扰,保证扩增灵敏度和平台不受影响。

移液可视化:红色示踪染料能起到移液可视化的作用,可以降低在逆转录过程中出现错加漏加的概率;

高逆转效率:与其他反转录试剂相比 RT101 可得到更小的 CT 值;

高基因组清除效率:可有效清除高达500 ng基因组DNA,使获得的数据更加真实可靠。

1.移液可视化

HisyGo RT Red SuperMix for qPCR (+gDNA Wiper) 中包含的红色示踪染料能起到移液可视化的作用,可以降低在逆转录过程中出现错加漏加的概率,其染料经过精心优化,不会对下游染料法或探针法qPCR的荧光信号采集产生干扰,以保证扩增灵敏度和平台不受影响。

2.高逆转录效率

以1 μg 293细胞 RNA 为模板,使用 Vazyme #RT101以及市售其他逆转录产品,按照各自说明书推荐程序进行逆转录反应,将产物cDNA进行多个基因的qPCR 定量分析。结果显示,Vazyme #RT101优于Supplier A、B、C的相关逆转录产品。

3.高基因组清除效率

以 500ng的293细胞 gDNA为模板,使用 Vazyme #RT101以及市售其他逆转录产品,按照各自说明书推荐程序进行基因组清除与逆转录反应,另设置不进行基因组清除的gDNA组,将得到的逆转录产物与gDNA组进行qPCR 定量分析。结果显示,Vazyme #RT101、Supplier A、C、D、F基因组清除效率优于Supplier B、E,可清除500ng基因组。

-30 ~ -15℃避光保存,≤ 0℃运输。

关键词:
RT101-00
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Q1:基因组清除不干净怎么解决?

A:若 No RT control指示基因组未清除完全,建议通过NTC实验排查是否存在气溶胶污染。若排除气溶胶污染后仍存在清除不完全的情况,可将去基因组反应时间延长至15 min。

 

Q2:RT101 兼容的RNA投入量范围?

A:RT101可兼容 5 ug 的RNA投入量,但过高的RNA产生的过多cDNA可能超出qPCR的定量范围,此时需要正确稀释cDNA以达到下游qPCR试剂的兼容范围。一般来说,RNA投入量为1~5μg 时,可将cDNA稀释10倍使用。  

 

Q3:RT101 后续能接PCR扩增吗? 

A:RT101是qPCR专用预混液,不推荐使用RT101的cDNA产物作为长片段扩增模板,一般来说,RT101逆转录产物不超过550 bp。若客户想进行PCR扩增,建议使用通用型试剂RT101。

 

Q4:RT101 是否需要混匀操作?

A:RT101 里面含有甘油成分,需要对逆转录试剂进行混匀操作。

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