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    CL101(单页版说明书)V23.1.pdf

    大小:
    2024-01-02 10:54:48
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FlysisAmp Cells Lysis Kit

仅需2步,7 min轻松获取细胞RNA
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CL101-01/02
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FlysisAmp Cells Lysis Kit

仅需2步,7 min轻松获取细胞RNA

体外细胞药效筛选,细胞RNA表达量检测

FlysisAmp Cells Lysis Kit是一款快速、高效的细胞RNA获取试剂盒,可兼容10 - 106 个培养细胞(贴壁或悬浮细胞)。本产品可在细胞培养板中直接完成基因组DNA清除和RNA获取,全流程仅需7 min,这种方法无须借助传统提取方式中的加热、清洗、转管和离心等步骤,提升效率的同时也可减少样品纯化过程中的损失。本试剂盒兼容广泛的细胞类型及细胞量,还可以解决传统提取方式中低细胞数提取效果不理想的问题。本试剂盒可用于高通量(96/384孔细胞板)获取细胞RNA,进行RT-PCR、RT-qPCR等多种下游实验。

1. 操作简单:仅需2步即可完成细胞RNA的获取

2. 速度快:样品处理仅需7 - 9 min,清除gDNA 并获取细胞RNA

3. 样本兼容性广:可兼容10 - 106个贴壁/悬浮细胞

4. 通量高:兼容不同的细胞培养板(384/96/24/12/6),可直接在孔板中完成RNA获取

1. 操作便捷无需传统提取的转管和离心等步骤,可直接在培养板中进行操作,仅需2步,7 - 9 min即可完成细胞gDNA的清除和RNA的获取。

图1. FlysisAmp Cells Lysis Kit操作流程

 

2. 样本兼容性广可兼容各种贴壁细胞和悬浮细胞,在10 - 106个细胞投入量下均可稳定扩增;可支持贴壁细胞直接在细胞培养板培养中原位裂解。

图2a.  不同细胞数裂解产物的扩增情况

 

图2b.不同细胞培养板培养的细胞所得裂解产物的扩增情况

 

3.兼容多种下游qPCR试剂:所得裂解产物可直接进行逆转录、一步法RT-qPCR,支持染料法、探针法qPCR;搭配优异的逆转录、扩增试剂,组合Cells to CT (Vazyme #CL121/ 122/ 131/ 132)全套试剂盒,可获得更优的扩增结果。

图3.CL101下游接探针法、染料法的扩增情况比对

 

-30 ~ -15℃保存,≤0℃运输。

 

未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

Q1:后续qPCR或PCR无扩增产物或产量较低

A1:① 细胞裂解不充分:

a. 裂解工作液添加较少:按照说明书推荐的细胞数、孔板数进行反应。

b. 裂解时未将细胞与裂解液工作液混匀:裂解时未将细胞与裂解液工作液混匀:添加裂解工作液时,将吸头伸入液面下加样,添加后直接用移液器吸打8 - 10次混匀。

② Stop Buffer未添加或未混合均匀:添加Stop Buffer时,将吸头伸入液面下加样,添加后直接用移液器吸打8 - 10次混匀。

③ 细胞投入量较少或裂解产物投入量较少:在推荐细胞投入量范围内适当提升细胞投入量或增加裂解产物投入量。

④ 细胞投入量过多,过多的细胞内容物抑制后续的扩增反应:根据推荐细胞投入量进行实验。

⑤ 样本中本身不含有靶标基因或表达量本身较低:提高细胞投入量检测或调整扩增体系。

⑥ 冻存细胞在冻存后使用PBS进行漂洗:冻存后细胞已破裂,PBS洗涤会造成RNA损失;建议重新培养细胞再进行实验。

 

Q2:RNA降解

A2:① RNA在操作前已降解:新鲜细胞处理后及时放置于冰上,避免长时间在室温放置。

② 裂解产物在室温放置时间过久,导致RNA降解:不要让裂解产物在室温下静置超过20 min,在冰上放置不超过2 h,及时进行后续试验或将裂解产物冻存于-80℃。

③ 细胞投入量过多,内源性RNase降解RNA:减少细胞投入量,根据推荐细胞投入量进行实验。

 

Q3:基因组DNA残留较多

A3:① 细胞投入量较高:细胞投入量<106个细胞。

② 裂解时间过短:适当延长裂解时间,但不超过10 min。

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