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HiScript Q RT SuperMix for qPCR

HiScript Q RT SuperMix for qPCR 预混液形式的两步法RT-qPCR 试剂  即用型的SuperMix 预混液使用方便省时 HiScript 两步法RT-qPCR 试剂盒以高性价比的HiScript Reverse Transcriptase 为基础,对反应体系进行大幅简化,即用型的SuperMix 将合成高质量第一链cDNA 所需的所有成分合并为一管5 × SuperMix,只需加入RNA 和水即可进行逆转录反应,RNA 体积最多可加至反应总体积的80%,非常适合于低浓度RNA 模板的逆转录反应,且SuperMix 在-20℃不会冻结,使用方便。 -20℃保存。
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HiScript Q RT SuperMix for qPCR

预混液形式的两步法RT-qPCR 试剂

第一链cDNA合成;低浓度RNA模板的逆转录反应;基因表达分析;两步法qRT-PCR检测

 即用型的SuperMix 预混液使用方便省时

HiScript 两步法RT-qPCR 试剂盒以高性价比的HiScript Reverse Transcriptase 为基础,对反应体系进行大幅简化,即用型的SuperMix 将合成高质量第一链cDNA 所需的所有成分合并为一管5 × SuperMix,只需加入RNA 和水即可进行逆转录反应,RNA 体积最多可加至反应总体积的80%,非常适合于低浓度RNA 模板的逆转录反应,且SuperMix 在-20℃不会冻结,使用方便。

-20℃保存。

关键词:
hiscript
supermix
反应
rna
进行
逆转录
使用方便
步法
rt-qpcr
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Q1:原核生物RNA能用我们的逆转录试剂吗?

A1:可以。原核生物RNA没有polyA尾,所以在逆转录反应体系中需要以Random primer作为逆转录引物。

 

Q2:延长逆转录时间,是否可以提高逆转录效率?

A2:对于大多数基因,延长逆转录时间对逆转录效率并没有显著提升;对于一些GC含量较高或含高级结构的模板,延长逆转录时间可提升逆转录效率。

 

Q3:如何评判RNA质量?

A3:RNA质量从两个方面反应:

(1) RNA完整度。通过琼脂糖凝胶电泳验证RNA完整度。以真核生物为例,完整的总RNA有清晰的三条带,分子量从大到小分别为28S、18S、5S,并且28S是18S亮度的两倍;若能看见三条带,但带型模糊或弥散,则说明RNA有部分降解,此时请立即进行逆转录反应,并适量加大模板量;若只能看见分子量很小的一条带或没有条带,则 RNA 已完全降解,需要重新提取。

(2) RNA的纯度。RNA的纯度可以通过OD260/280和OD260/230两个比值是否在1.8-2.1范围内进行判断,蛋白、离子等残留会使比值降低。

 

Q4:如何选择逆转录的引物?

A4:根据实验的具体情况选择随机引物、Oligo dT或基因特异性引物进行逆转录。

(1) 随机引物:随机结合在RNA的任何区域,适用于rRNA、mRNA、tRNA等所有RNA类型的逆转录反应。

(2) Oligo dT:适用于具有PolyA尾的RNA(原核生物RNA、真核生物的rRNA和tRNA不具有PolyA尾)。 由于Oligo dT结合在PolyA尾上,所以对 RNA 样品的质量要求较高,即使有少量的降解也会使全长cDNA合成量大大减少。

(3) 基因特异性引物:与模板序列互补,适用于序列已知的基因逆转录。

cDNA后续进行PCR扩增长片段,一般用Oligo dT或者基因特异性引物,不建议使用随机引物,因为随机引物是随机结合的,cDNA片段会偏短,可能会对长片段扩增造成稀释,后续扩增不出全长的目的基因;cDNA后续进行qPCR,一般使用Oligo dT和随机引物的混合物,可以避免3’端和5’端的扩增偏好性。

 

Q5:可以通过测逆转产物cDNA浓度判定逆转效率吗?

A5:不可以,逆转录产物cDNA是混合物,除了cDNA产物以外,还有buffer、逆转录酶、引物,同时还包含未转录的模板RNA,总RNA中的tRNA、rRNA等,都会干扰浓度测定结果,因此不能反应真实的cDNA产量。

Zhou H, Su J, Hu X, et al. Glia-to-Neuron Conversion by CRISPR-CasRx AlleviatesSymptomsofNeurologicalDiseaseinMice. Cell. 2020, 181(3): 590-603.e16. PMID:32272060 (IF:38.638)

Xiao Q, Xu Z, Xue Y, et al. Rescue of autosomal dominant hearing loss by in vivo delivery of mini dCas13X-derived RNA base editor. Sci Transl Med. 2022, 14(654): eabn0449. PMID:35857824 (IF:19.319)

Gao N, Hu J, He B, et al. Endogenous promoter-driven sgRNA for monitoring the expression of low-abundance transcripts and lncRNAs. Nat Cell Biol. 2021, 23(1): 99-108. PMID:33398178 (IF:17.728)

Wang Q, Chen C, Xu X, et al. APAF1-Binding Long Noncoding RNA Promotes Tumor Growth and Multidrug Resistance in Gastric Cancer by Blocking Apoptosome Assembly. Adv Sci (Weinh). 2022, e2201889. PMID:35975461 (IF:17.521)

Chen Y, Wang J, Xu D, et al. m6A mRNA methylation regulates testosterone synthesis through modulating autophagy in Leydig cells. Autophagy. 2021, 17(2): 457-475. PMID:31983283 (IF:16.016)

Li Y, Feng Y, Liu X, et al. Songorine promotes cardiac mitochondrial biogenesis via Nrf2 induction during sepsis. Redox Biol. 2021, 38: 101771. PMID:33189984 (IF:11.799)

Ma Y, Ran D, Cao Y, et al. The effect of P2X7 on cadmium-induced osteoporosis in mice. J Hazard Mater. 2021, 405: 124251. PMID:33168313 (IF:10.588)

Xiao P, Xie Z, Kuang Y, et al. Discovery of a potent FKBP38 agonist that ameliorates HFD-induced hyperlipidemia via mTOR/P70S6K/SREBPs pathway. Acta Pharm Sin B. 2021, 11(11): 3542-3552. PMID:34900535 (IF:11.613)

Li Y, Li Y, Liu X, et al. Blockage of citrate export prevents TCA cycle fragmentation via Irg1 inactivation. Cell Rep. 2022, 38(7): 110391. PMID:35172156 (IF:9.995)

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